貫葉連翹提取物金絲桃素

英文名稱：St. John’s Wort P.E.
分析指標：總金絲桃素
藥用部位：全草
外 觀：黑棕色粉末
含 量：總金絲桃素≥0.3%
檢測方法：UV

含 量 總金絲桃素≥0.3%
粒 度 100%通過 80 目
干燥失重 ≤5.0%
熾灼殘渣 ≤5.0%
重 金 屬 <20ppm
砷 <2ppm
容積殘留 歐洲藥典2000版
微生物指標：
細菌總數 <1000cfu/g
霉 菌 <100cfu/g
大腸桿菌 未檢出
沙門氏菌 未檢出
結 論：符合規格要求
貯 存：存于陰涼干燥處
有效期：兩年

貫葉連翹提取物

類別：抗菌消炎、抗抑郁、獸藥

提取來源：藤黃科金絲桃屬多年生草本植物貫葉連翹

有效成分：貫葉連翹全草含苯并二蒽酮類化合物：金絲桃素(Hypericin)、偽金絲桃素(Pseudohypericin)、原金絲桃素(Protohypericin)、原偽金絲桃素(Protopseudohypericin)、環偽金絲桃素(Cyclopseudohypericin)、異金絲桃素(Isohypericin)、大黃素-恩酮(Emodin-anthrone)、金絲桃輔脫氫二蒽酮(Hypericode-hydrodianthrone)等（見圖1）偽金絲桃素的含量通常比金絲桃素高2-3倍，原金絲桃素、原偽金絲桃素主要存在于新鮮植物中，在日光下會轉化為金絲桃素和偽金絲桃素，環偽金絲桃素則是偽金絲桃素氧化產物。

工藝特點：以中國連翹主產區伏牛山優質連翹為原料，利用堿醇法提純，減壓干燥法干燥。連翹苷、連翹酚的含量達3%（高效液相法）以上。

連翹提取物2006-12-30 10:07原料：連翹又稱黃金條、黃壽丹，屬木器科落葉叢生灌木。連翹株高八至九尺，莖叢生直立，枝條開展而下垂，節間中空，節部有木髓。三、四月先花后葉，花可開至五月。花一至數朵腋生，花冠金黃色，長約半寸余，花冠內有桔紅色條紋。為木犀科植物連翹Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl的干燥果實。英文名：FRUCTUS FORSYTHIAE

分布：連翹多生于山野荒坡間，主要產于遼寧、河北、河南、山東、江蘇、湖北、江西、云南、山西、陜西等地。秋季果實初熟尚帶綠色時采收，除去雜質，蒸熟，曬干，習稱青翹；果實熟透時采收，曬干，除去雜質，習稱老翹。連翹果實呈長卵形至卵形，稍扁，長1.5～2.5厘米，直徑0.5～1.3厘米。表面有不規則的縱皺紋及多數凸起的小斑點，兩面各有一條明顯的縱溝。頂端銳尖，基部有小果梗或已脫落。青翹多不開裂，表面綠褐色，凸起的灰白色小斑點較少；質硬；種子多數，黃綠色，細長，一側有翹。老翹自頂端開裂或裂成兩瓣，表面黃棕色或紅棕色，內表面多為淺黃棕色，平滑，具一縱隔；質脆；種子棕色，多已脫落。氣微香，味苦。

鑒別：

（1）本品果皮橫切面：外果皮為 1列扁平細胞，外壁及側壁增厚，被角質層。中果皮外側薄壁組織中散有維管束；中果皮內側為多列石細胞，長條形、類圓形或長圓形，壁厚薄不一，多切向排列成鑲嵌狀，并延伸至縱隔壁；內果皮為1 列薄壁細胞。

（2） 取本品粉末 1g，加氯仿 30ml，加熱回流1小時，濾過，棄去濾液，藥渣揮干，加甲醇40ml，加熱加流1小時，濾過，濾液濃縮至約1ml，加于聚酰胺柱（14～30目，3g,內徑1～1.2cm，用水50ml預洗）上，用水50ml洗脫，棄去水液，再用乙醇100ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加水30ml使溶解，濾過，濾液置分液漏斗中，用醋酸乙酯提取2 次，每次20ml，合并提取液，蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取連翹對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄Ⅵ B）試驗，吸取上述兩種溶液各2μl，分別點于同一以含5%磷酸二氫鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G薄層板上，置以苯－丙酮－醋酸乙酯－甲醇-水（20:25:30:3:3） 為展開劑的展開缸中飽和30分鐘，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點；再噴以香草醛硫酸試液，加熱至斑點顯色清晰，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

連翹果皮中含齊墩果酸、連翹酚。青翹中含皂甙4.89%、生物堿0.2%。新鮮的葉枝含連翹苷，含量與果實中含量相當。

提取物性狀：本品為棕褐色粉末 ; 氣香，味苦。連翹的95%酒精的提取物，在日本已大量用于食品的保鮮劑。

【鑒別】 取本品粉末 0.1g , 加甲醇 10ml ，超聲處理 20 分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取連翹對照藥材 1g ，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（附錄 VIB ）試驗 , 吸取上述兩種溶液各 10~15μl, 分別點于以羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠 G 薄層板上 , 以氯仿－甲醇 (5:1) 為展開劑 , 展開 , 取出 , 晾干 , 噴以 10% 硫酸乙醇液 , 于 105 ℃ 加熱使斑點顯色清晰 , 供試品色譜中 , 在與對照藥材色譜相應位置上 , 顯相同顏色斑點。

【含量測定】

連翹甙forsythin含量測定

照高效液相色譜法（《中國藥典》 2000 年版一部附錄 VI D ）測定。

色譜條件及系統適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑 ; 乙腈－水（ 25: 75 ）為流動相 ; 檢測波長 277nm; 理論板數按連翹甙峰計算應不低于 3000 。

對照品溶液的制備 精密稱取連翹甙對照品適量 , 加甲醇制成每 1ml 含 0.2mg 的溶液 , 搖勻，即得。

供試品溶液的制備 取本品粉末約 1.0g [ 同時另取本品測定水分（《中國藥典》 2000 年版一部附錄 IX H 第一法） ], 精密稱定 , 置具塞錐形瓶中 , 精密加甲醇 15ml, 密塞 , 稱定重量 , 浸漬過夜 , 超聲處理 25 分鐘 , 放冷 , 密塞 , 再稱定重量 , 用甲醇補足減失重量 , 搖勻 , 濾過 , 精密量取續濾液 5ml, 蒸至近干 , 加中性氧化鋁 1.5g 拌勻 , 加于中性氧化鋁柱（ 100-120 目 , 3g , 內徑 1 ～ 1 .5cm ）上 , 用 70 %乙醇 240ml 洗脫 , 收集洗脫液 , 濃縮至干 , 殘渣用 50 %甲醇溶解后轉移至 10ml 量瓶中 , 加 50 %甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜（ 0.45μm ）濾過 , 即得。

測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各 10μl, 注入液相色譜儀測定 , 即得。

本品按干燥品計算 , 含連翹甙（ C 29 H 36 O 15 ）不得少于 0.5% 。

【制法】 取連翹原藥材（或連翹新鮮莖葉） , 粉碎成粗粉 , 加 12 倍量水煎煮 3 次，每次 1.5 小時 , 合并煎液，濾過，濾液于 60 ℃ 以下減壓濃縮至相對密度 1.1 ～ 1.2 （室溫） , 放置至室溫，加入 4 倍量 95 %乙醇 , 攪勻，靜置 2 小時，沉淀 , 濾過 , 濾液減壓回收乙醇 , 濃縮液噴霧干燥 , 即得。

藥物分析

    方法名稱： 連翹提取物－連翹苷的測定－高效液相色譜法

應用范圍： 本方法采用高效液相色譜法測定連翹提取物中連翹苷的含量。

本方法適用于連翹經加工制成的提取物。

方法原理： 本品加甲醇超聲處理，放冷，補重，搖勻，濾過，續濾液蒸干，過柱，洗脫液濃縮至干，殘渣用50%甲醇溶解定容，搖勻，濾過，續濾液進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長277nm處檢測連翹苷的吸收值，計算出其含量。

試劑： 1. 乙睛

2. 甲醇

3. 50%甲醇

4. 70%乙醇

儀器設備： 1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數按連翹苷峰計算應不低于3000。

1.3 紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙睛 水 =25 75

2.2檢測波長：277nm

2.3柱溫：室溫

試樣制備： 1. 稱取供試品

精密稱定本品1g，為供試品。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取連翹苷對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.2mg的溶液。

3. 供試品溶液的制備

取本品約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加甲醇15mL，稱定重量，浸漬過夜，超聲處理（功率100W，頻率40kHz）25分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液5mL，蒸至近干，加中性氧化鋁1.5g，拌勻，加置中性氧化鋁柱（100~200目，3g，內徑1~1.5cm）上，用70%乙醇240 mL洗脫，收集洗脫液，濃縮至干，殘渣用50%甲醇溶解并轉移至10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，搖勻，濾過，續濾液作為供試品溶液。

操作步驟： 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長277nm處測定連翹苷（C29H36O15）的峰面積，計算出其含量。